蝦類AHPND/EMS與弧菌問題解決方案

蝦類急性肝胰腺壞死症(AHPND),或是俗稱的早期死亡症候群(EMS),或是偷死病,為一種帶有毒素基因及特殊質體(AHPND plasmid, pVA)的副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)所引起。當此種致病的副溶血弧菌進入蝦的消化道,在蝦的胃增生,即會產生導致肝胰腺壞死的致病毒素(PirA/B),破壞蝦的肝胰腺,造成死亡。要徹底解決AHPND的問題,須採取釜底抽薪的方法,即是避免致病的副溶血弧菌進入蝦體內,或進入蝦體內之後徹底清除致病菌,如不幸達發病階段,除了清除蝦體內的副溶血弧菌,還要進一步的中和致病毒素。
除了AHPND所造成的重大經濟損失,其他弧菌也造成嚴重的養殖問題,例如螢光弧菌的哈維氏菌(Vibrio harveyi),尤其近年來在蝦苗培苗過程或大池養殖過程經常可見螢光弧菌的蹤影。弧菌主要來源為水體及生餌,只要能夠控制池水及蝦體內弧菌數量,佐以建構養殖池水及消化道內益生菌的菌相,就可以大幅降低弧菌對蝦養殖造成的傷害。

因此針對弧菌疾病的預防與治療,必須從以下幾點著手:

1.了解池內與蝦體內弧菌與總菌的數量、比例與菌相
2.有效降低池內的弧菌濃度與維持益生菌菌相穩定
3.有效降低蝦體內的弧菌濃度與維持消化道益生菌菌相穩定


解決方案如下:

1.了解池內與蝦體內弧菌與總菌的數量、比例與菌相
利用海水總菌培養基弧菌選擇性培養基計數與評估菌相,並持續監控池水與蝦體內菌相的變化以確定對抗弧菌的策略是否奏效。

2.有效降低池內的弧菌濃度與維持益生菌菌相穩定
於放養蝦苗前先施用衛青,維持池水內益生菌的菌相。當上述海水總菌培養基弧菌選擇性培養基計算的弧菌/總菌比上升至超過1/10後,或是池內有螢光弧菌的問題時,於池內施用衛青,每三天施用一次,直到弧菌/總菌比回歸正常。此時如果總菌數量仍低於105 cfu/毫升,則再施用衛青殺污盡,直到總菌數量回歸標準。

3.有效降低蝦體內的弧菌濃度與維持消化道益生菌菌相穩定
蝦體內的弧菌可能是來自於蝦苗階段,也有可能來自於大池。有可能是隨著餌料吃進去的,也有可能是來自於環境。因此必須針對以下幾點進行討論。

<1>蝦苗階段體內弧菌解決方案:
A.去除豐年蝦表體弧菌:在豐年蝦孵化過程中,造成孵化桶內的弧菌大量孳生,並附著於豐年蝦體上,一旦蝦苗幼體吃到含弧菌的豐年蝦,會造成消化道負擔。於孵化豐年蝦時,在正要孵化前16至24小時於孵化桶內施用淨趕瘟,徹底去除孵化桶內的弧菌。
B.去除蝦苗池池水弧菌:在蝦苗培育過程中,由於水體養份充足,容易造成弧菌大量孳生,導致蝦苗疾病問題和抗生素濫用問題。建議選用專門去除弧菌而不會傷害其他益生菌的特殊技術,搭配益生菌使用,有效控制池內弧菌數量。於放入幼苗前在池中施用衛青,當弧菌選擇性培養基上顯示弧菌超標,或是池內有螢光弧菌的問題時,於池內施用衛青,每三天施用一次。
C.去除蝦苗體內弧菌:在採行上述兩樣策略後,原則上蝦苗體內的弧菌數應可被控制。但仍有可能經由藻水,或是準備人工藻片時帶入並被吃進蝦體內。持續以弧菌選擇性培養基計數與監控蝦苗體內弧菌是必要的,當弧菌數突然飆高,應以衛青拌人工藻片後餵食,唯使用頻率與劑量必須嚴格遵守說明書上的指示。
D.建立蝦苗消化道益生菌菌相:持續以海水總菌培養基計數與監控蝦苗體內總菌數也是強烈建議的,當總菌數不足時,弧菌突然飆高的機會就會大增,此時應以和去病拌人工藻片後餵食。和去病的配方完全是針對蝦腸道的特性所開發的產品,十分溫和且有效,因此從一開始即持續以和去病拌人工藻片後餵食蝦苗,就是最佳保持腸道健康,避免日後因弧菌導致疾病發生的方法。

<2>標粗階段體內弧菌解決方案:
標粗階段是放入大池前,最佳去除蝦體內弧菌的黃金時期,此時購買蝦苗的體內菌相不明,必須以弧菌選擇性培養基海水總菌培養基計數與監控蝦苗體內的菌相,直到放置於大池前。
A.弧菌數超標:表示培苗過程弧菌控制差,生物安全性控制差,此時每三天以衛青拌料餵食一次,逐步清除體內弧菌。
B.總菌數不足或無總菌:代表培苗過程使用抗生素,此時每天以和去病拌料餵食,逐步重建體內益生菌相。
C.當標粗池水中弧菌超標,或是有螢光弧菌的問題時,於池內施用衛青

<3>大池階段體內弧菌解決方案:
當大池階段發現有空腸空胃、倒藻、環境應急、螢光弧菌滋生,甚至於AHPND症狀出現時,應立刻以弧菌選擇性培養基海水總菌培養基檢查蝦腸道內的菌相。
A.弧菌數超標:此時每三天以衛青拌料餵食一次,逐步清除體內弧菌。
B.總菌數不足:此時每天以和去病拌料餵食,逐步重建體內益生菌相。
C.可於池內搭配施用塘三藏系列穩定養殖環境,以瞬污控吸附池內潛在的環境毒素,助巴潔有效處理底土腐質物,穩定池內氨氮亞硝酸濃度,以及殺污盡提升池內益生菌總數,抑制弧菌滋生。
D.如果有螢光弧菌問題伴隨,應定期補充衛青

<4>AHPND爆發解決方案:
上述弧菌問題的解決對策可有效降低AHPND的發生機率,但是畢竟AHPND對產業的威脅程度與致死率遠大於一般的弧菌疾病,因此在應變的速度與防疫上必須更加的謹慎。以下是針對於AHPND確診的方式與爆發後緊急應變的建議策略:
A. 確診:確定環境與蝦體內的確有AHPND致病株
1. 環境:環境池水中檢出AHPND致病株並不代表一定會發病,只是表示存在發病的潛在風險。當池水被確診後,弧菌選擇性培養基上長出之綠色菌落愈多,代表著發病的機率愈高。
i. 將水利用cubee離心機處理後,以POCKIT micro plus核酸檢測系統,搭配IQ plus AHPND檢測試劑組針對沈降物進行核酸檢驗。
ii. 取弧菌選擇性培養基上長出之綠色菌落,直接以POCKIT micro plus核酸檢測系統,搭配IQ plus AHPND檢測試劑組進行核酸檢驗。

2. 蝦體:可以取蝦胃或中腸,利用Grind-N-Go快速DNA萃取系統,以及POCKIT micro plus核酸檢測系統,於現場立刻確診蝦體是否帶有AHPND致病株。必須注意的是,蝦胃中檢出代表AHPND致病株已經進入蝦體內,當此致病株持續滋生時,即會開始產生毒素,導致蝦死亡,但是檢出並不代表已經是處於發病階段。蝦中腸檢出代表AHPND致病株已經進入蝦體,同時已經開始產生毒素,並破壞肝胰腺,也就是此時已經是處於發病階段,後續處理刻不容緩。
B.去除蝦體內弧菌:當蝦胃經POCKIT micro plus核酸檢測呈AHPND陽性,而中腸呈陰性時,應立即著手清除蝦體內AHPND病原菌。除了應每三天以衛青拌料餵食一次,逐步清除體內AHPND致病株的量,再每餐以和去病拌料餵食,修復受損消化道細胞,逐步重建體內益生菌相之外,前兩天每一餐也都同時以淨趕瘟拌料,以收立即效果。
C.去除蝦體內毒素:當蝦中腸經POCKIT micro plus核酸檢測呈AHPND陽性,且出現空腸空胃的症狀時,代表進入疾病爆發階段,除了採用上述去除蝦體內弧菌之策略以降低消化道內致病株的數量,還必須中和致病毒素,才是控制疫情的關鍵。其方法為在每餐飼料中拌入安克毒,以及瞬污控,以降解和吸附蝦體內的毒素。上述這些添加劑成分穩定且安全,可以一併使用。
D.去除池水內弧菌及毒素:於池水中潑灑衛青,以抑制AHPND致病株的滋生。另可同時於池內搭配施用塘三藏系列穩定養殖環境,以瞬污控吸附AHPND致病毒素,同時使用助巴潔有效處理底土腐質物,穩定池內氨氮亞硝酸濃度,以及殺污盡提升池內益生菌總數,抑制弧菌滋生,優化養殖環境。
E.如果癒後有餵料不長的現象發生時,可以施用新肝寶